Ácidos nucleicos recombinantes en la naturaleza
La Onconasa (ONC), es una
RNasa que posee gran actividad citotóxica, procedente de oocitos y embriones
tempranos de Rana pipiens que se encuentra en estudios clínicos de fase III
como agente antitumoral para el tratamiento de mesotelioma maligno presentando
selectividad para células tumorales. Al unirse a la superficie de células
tumorales y ser internalizada en el citosol, la ONC causa la muerte celular
como resultado de la potente inhibición de la síntesis proteica mediante un
mecanismo que implica la degradación del RNA celular.
ADN recombinante artificial
Tema: Péptidos antihipertensivos recombinantes
Objetivo: Expresar y purificar péptidos antihipertensivos recombinantes para estudiar su bioactividad en ratas
Gen o secuencia a clonar: ADN que codifica la secuencia para Gly-Val-Tyr- Pro-His-Lys (GVYPHK)
Enzima de restricción: BamH I, Nde I
Enzima ligasa: T4 DNA ligasa
Vector: pET-15b
Célula receptora: E. coli DH5α
Mecanismo de transferencia o inserción del gen: Transformación bacteriana
Métodos de identificación de clones:
- Cultivo
- Gen: PCR, secuenciación de genes, mapa de restricción (digestión enzimática)
- Proteína recombinante: HPLC (cromatografía líquida de alta eficacia)
- Bioactividad: Administración oral a ratas, toma de la tensión arterial
Referencias bibliográficas:
1. Proteínas recombinantes con efecto antitumoral [Internet]. Vilanova.M, Benito.A, Ribó. Marc. Universidad de Girona. 2012. Disponible en: http://www.oepm.es/pdf/ES/0000/000/02/38/80/ES-2388020_A1.pdf
2. Wang X, Ma S, Yuan Y, Ding Y, Li D. Expression and purification recombinant antihypertensive peptide ameliorates hypertension in rats with spontaneous hypertension. Protein Expr Purif [Internet]. 2015 [citado el 23/07/2022]; 113: 30-34. Disponible en: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25962740/
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